Diagnostyka zakazen grzybiczych 20.02.2012r.
Diagnostyka mikologiczna
· Rozpoznanie zakażenie grzybiczego skory i jej przydatków opiera się na charakterystycznym obrazie klinicznym oraz wynikach Bad. Mikologicznego
· Mimo ze znacznej części przypadków obraz klin. sugeruje zakażenie grzybicze, uważa się, ze sama analiza wygładu morfologicznego zmian nie upoważnia do ustalenia rozpoznania
· Pełne Bad. Mikologiczne składa się bezpośredniego badania i hodowli
·
Bad. w lampie Wooda
· Lampa Wooda jest to lampa z filtrem (szkło pokryte jest solami niklu) eliminacja prom UV o dl fali 365nm
· Służy do ujawnienia fluorescencji zmian w niektórej postach grzybic i do diagnozy łupieżu rumieniowego ….
· Grzyby Malassezia świecą wszędzie tam gdzie się znajda
Pobranie mat. Do badania
· Odpowiednie pobranie materiału odgrywa kluczowa role w dalszej procedurze diagnostycznej
· Jeżeli materiał pobierany jest w pracowni mikologicznej to pobieramy go albo bezpośrednio na szkiełko podstawowe ( w celu sporządzenia preparatu) lub do szklanych okrągłych szalek Petriego (mat. Do Bad. Hodowlanego)
· Jeśli mat. Ma być posłany do pracowni musimy go odpowiednio zabezpieczyć
Techniki wykonania preparatów bezpośrednich:
· Preparat przeżyciowy w soli fizjologicznej
· Preparat rozjaśniony : 10 – 20 % KOH, DMSO, laktofenol(płyn Amanna- oprócz rozjaśniania dodatkowo barwi) – rozjaśniamy np. by zobaczyć zarodniki, preparat dobieramy w zależności od tego co chcemy zobaczy i jak długo chcemy by było to widoczne
· Preparat tuszowy
· Preparat utrwalony barwiony metodami Grama, Giemzi i PAS
Materiał ogląda się pod mikroskopem w odczynniku o wybitnych właściwościach rozjaśniających dwumetylosulfotlenek(DMSO) i 20% KOH
Łupież pstry- Malassezia odpowiedzialna za tą chorobę
Włos- preparat bezpośredni
Podłoża do hodowli grzybów
· Podłoża lub pożywki do hodowli uzyskuje się poprzez zestawienie różnych składników chem., zabezpieczających wymagania odżywcze
· Podłoża Nat.- są to wyciągi roślin lub tkanek zwierzęcych np.
· Agar z brzeczką (1% pepton, 2% agar)
· Ekstrakt słodowy stosowany w pożywkach jako pełnowartościowy dodatek odżywczy, agar z ekstraktem słodowym
· Podloza peptonowe – bulion i agar Sabourauda ( z chloramfenikolem i aktidionem (cykloheksymidem) – 0,003 – 0,005 %)
· Podłoża syntetyczne – chem okreslenie np. podloze Czapek – doxa- podłoże mineralne
· Podloza agarowe Sabourauda z dodatkiem oliwki z oliwek, do chodowli grzybów z rodzaju Malassezia w tem 27 i 37 oC
Malassezia- agar S. z dodatkiem oliwy, z dodatkiem mleka krowiego , agar Dixona
Najczęściej barwione płynem Amana i błękitem metylenowym
Microconidia – jednokomórkowe, makro konidia jednokom. Lub podzielone
Trihophyton mentagraphes strzępki z mikro- i makrostrzępkami
Candida albicans- hodowla śmietankowata
Podłoża różnicujące
Agar ryżowy(chlamydosporowy)- ubogie, ale dobrze i łatwo się na nim hoduje Chlamyda Candida lub inne Candida
Diagnostyka mikologiczna- test filamencji. Candida albicans – germ tube; b. szybki test
Preparat z hodowli wygląda tak jak preparat ze skóry
· Służą do wykrywania charakt. Cech u izolowanych gatunków ( w tym również cech biochemicznych)
· Zawierają skl. podstawowe, substrat lub substraty oraz wskaźniki( dawniej niektóre płyny zawierały jeszcze zbiorniczek na gaz, tzw. Rurkę Durhama) np. podłoże Christensena ( do określenia zdolności wytwarzania urazy – służy do różnicowania T. mentagraphes i t,. rubrum)
· Podłoża zubożone do wykrywania chlamidospor i pseudogrzybni, np. ziemniaczano- marchwiowo – żółciowe, Niekresona – Mańkowskiego, agar ryżowy, agar chlamydosporowy)
· Podłoża chromogenie do wybiorczej izolacji drożdżaków i bezpośredniej identyfikacji Candida albicans
· DTM – podłoża do identyfikacji dermatofitów
Zygogramy i auksonogramy
Do badania zdolności fermentacji cukrów używa się zestawu podłoża, tzw.
Zygogramy – zawierającego glukozę, galaktozę, laktozę, maltozę, sacharozę
Auksonogram- to badanie zdolności asymilacji czyli przyswajania węgla z …
Oznaczenie wrażliwości grzybów na leki przeciwgrzybicze - antymikogram
2
KasiekJay